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大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒实验设置复孔有什么好处?

发布时间: 2021-10-21  点击次数: 97次
  大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒实验设复孔个人认为有以下几个优点:
  1、试验中的随机性比较大,设多个复孔可以去处部分偏差大的数据减少检测的误差;
  2、设置多个复孔具有统计学意义,否则很难说明数据是偶然的还是真实的;
  3、设置复孔可以避免由于主观因素造成的误差;
  总的来说是为了,你得到的数据更接近与真实值,避免试验客观和主观误差。  
  大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒操作步骤:
  1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5、每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9、大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒在450nm波长处测定各孔的OD值。
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