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简单的介绍下兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒的操作步骤

发布时间: 2019-12-06  点击次数: 201次
   简单的介绍下兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒的操作步骤
  兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被兔催乳素捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的兔催乳素(PRL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中兔催乳素(PRL)的含量。
  兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒简单的操作步骤:
  (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原;
  (2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗-体复合物;
  (3)加酶标抗抗体;
  (4)加入酶促反应底物,发生显色反应,显色的深浅与待测抗体的量成正比。
  兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒在检测过程中值得关注的问题:
  浓缩:由于净化过程中引入的溶剂,可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析,需要去除全部有机溶剂。即使用兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒前处理步骤中把样本在60℃氮气下吹干,再用复溶液溶解干燥残留物。
  浓缩方式:氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。
  注意:
  1.在吹干样本之前,用甲醇清洗针头,防止杂质干扰。
  2.在吹样本时,针头应在液面上空,避免与样本接触,防止产生交叉污染。
  3.样本吹干后应立即取下,避免吹的时间过长,影响检测结果。
  4.不同的药物,吹干后样本的保质期不同,提倡待样本回到室温后立即复溶。
  5.净化:经过提取的待测组分中通常含有一些会干扰试剂盒中抗原抗体反应的杂质或者是含有与待测物结构相似的杂质。将待测组分与杂质分离的过程,我们称为兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒中样本的净化。在我们现有的试剂盒前处理方法中涉及到的常见的净化是:液液分配法。比如:用复溶液溶解干燥残留物之前先加入适量的正己烷,在加入正己烷和复溶液涡动后如果出现乳化现象,可以60℃水浴加热,至乳化现象消失或减弱后,加大离心转速进行离心。
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