猴γ干扰素（IFN-γ）ELISA试剂盒使用相关问题解析

　　猴γ干扰素（IFN-γ）ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。将样品、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入被捕获抗体包被的包被微孔中，孵育并*洗涤。与底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色，在酸的作用下变成最终的黄色。颜色深度与样本中的颜色深度呈正相关。用酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值）并计算样品浓度。

 

　　猴γ干扰素（IFN-γ）ELISA试剂盒样品处理和要求：

　　1、血清：全血标本室温放置2小时或4℃过夜，1000g离心20分钟，取上清液检测，或标本保存于-20℃或-80℃℃，但应避免反复冻融。

　　2.血浆：EDTA或肝素可用作抗凝剂。样品采集后30分钟内，2-8℃1000g离心20分钟，或保存于-20℃或-80℃，但应避免反复冻融。

　　3、细胞培养上清液或其他生物样品：1000g离心20分钟，取上清液检测，或保存在-20℃或-80℃，但避免反复冻融。

　　注意：样品溶血会影响后期检测结果，因此溶血样品不应进行检测。

　　猴γ干扰素（IFN-γ）ELISA试剂盒使用相关问题解析：

　　1、试剂选择：试剂在检测前应提前半小时在室温下解冻。

　　2、加样过程中可能出现的问题：当使用血清或血浆作为检测试剂时，血清和血浆难以分离。这时候的解决办法是在室温下放置1~2小时，然后离心。

　　3、洗盘容易出错：因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动。

　　4、显色问题：使用过期的显影剂或显影剂使用后放置时间过长，可能导致显影剂不显色。因此，在进行显色反应时，首先要检查显影液本身的状况。

　　5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒。

　　6、读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净。