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猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒使用相关问题解析

发布时间: 2021-12-15  点击次数: 396次
  猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。将样品、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入被捕获抗体包被的包被微孔中,孵育并彻底洗涤。与底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色,在酸的作用下变成最终的黄色。颜色深度与样本中的颜色深度呈正相关。用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值)并计算样品浓度。

 

猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒

 

  猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒样品处理和要求:
  1、血清:全血标本室温放置2小时或4℃过夜,1000g离心20分钟,取上清液检测,或标本保存于-20℃或-80℃℃,但应避免反复冻融。
  2.血浆:EDTA或肝素可用作抗凝剂。样品采集后30分钟内,2-8℃1000g离心20分钟,或保存于-20℃或-80℃,但应避免反复冻融。
  3、细胞培养上清液或其他生物样品:1000g离心20分钟,取上清液检测,或保存在-20℃或-80℃,但避免反复冻融。
  注意:样品溶血会影响后期检测结果,因此溶血样品不应进行检测。
  猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒使用相关问题解析:
  1、试剂选择:试剂在检测前应提前半小时在室温下解冻。
  2、加样过程中可能出现的问题:当使用血清或血浆作为检测试剂时,血清和血浆难以分离。这时候的解决办法是在室温下放置1~2小时,然后离心。
  3、洗盘容易出错:因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动。
  4、显色问题:使用过期的显影剂或显影剂使用后放置时间过长,可能导致显影剂不显色。因此,在进行显色反应时,首先要检查显影液本身的状况。
  5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒。
  6、读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净。
 
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