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人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒要遵循基本的操作事项

发布时间: 2020-05-19  点击次数: 155次
  人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒适用于血清、血浆、唾液、尿液、细胞培养上清等多个样本。遵循一定的操作事项是确定其使用效果的基本要求。
  人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒使用方法:
  1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
  2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
  3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);每孔再加入酶标工作液100μL;空白对照孔不加。
  4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
  6、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,37℃避光显色15min。
  7、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应。
  8、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
  9、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
 

人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒

  人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒注意事项:
  1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
  3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
  4、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
  5、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
  6、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。
  7、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
  
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