人基质金属蛋白酶4（MMP-4）ELISA试剂盒适用于血清、血浆、唾液、尿液、细胞培养上清等多个样本。遵循一定的操作事项是确定其使用效果的基本要求。
人基质金属蛋白酶4（MMP-4）ELISA试剂盒使用方法：
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；每孔再加入酶标工作液100μL；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。
6、显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，37℃避光显色15min。
7、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应。
8、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
9、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
人基质金属蛋白酶4（MMP-4）ELISA试剂盒注意事项：
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
5、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
6、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
7、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
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