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兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒操作步骤如下

发布时间: 2023-05-09  点击次数: 87次
  兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒是一种常用于检测兔子血清、血浆或其它生物样品中催乳素含量的试剂盒。催乳素是前垂体分泌的一种多肽激素,主要调节哺乳动物的乳腺发育和乳汁分泌,并参与调节生殖周期、代谢途径等生理过程。
  
  一、试剂盒原理
  
  试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),即将标准品或样品加入已涂有特异性抗体的微孔板孔中,使其与抗体结合,不结合的洗脱掉并加入辣根过氧化物酶标记的二抗,在其余的孔中与抗体结合,最后加入底物使其产生颜色反应,用光谱计测定反应强度,据此计算出标本中催乳素的含量。
  
  二、试剂盒成分
  
  兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒包括微孔板、催乳素标准品、抗体试剂、辣根过氧化物酶标记的二抗试剂、显色底物、停止溶液、洗涤缓冲液等多种试剂,其中标准品常用浓度为500ng/L,抗体及其它试剂按比例配制。
  

兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒

 

  三、操作步骤
  
  1、取出微孔板,标注标本顺序。
  
  2、加100μl标准品或待测样本到每个孔中。
  
  3、加50μl抗体试剂到每个孔中,振荡混合保温1-2小时。
  
  4、弃去孔内液体,洗涤4-5次,使孔内洁净。
  
  5、加100μl辣根过氧化物酶标记二抗到每个孔中,振荡混合保温1小时。
  
  6、弃去孔内液体,洗涤4-5次,使孔内洁净。
  
  7、加入100μL显色底物到每一个孔中,避免接触到阳光,在30min到60min内孵育,制止反应。
  
  8、加入50μL停止溶液到每个孔中,用光谱计测定吸光值A450。
  
  四、注意事项
  
  1、试剂盒的使用前需要将试剂恢复至室温,并均匀摇匀。
  
  2、试剂盒应在规定的有效期内使用,过期试剂可能降低检测的准确性。
  
  3、严格遵循试剂盒说明书中的步骤和比例配制,不同于说明书的操作可能会影响检测结果。
  
  4、使用前需要根据实验需要决定样品的预处理方式,如稀释、提取等。
  
  5、使用过程中应严格按要求保护试剂盒免受光线和温度等不利因素影响,以保证试剂的灵敏度和可靠性。
  
  总之,兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒是一种简便、高效的检测兔子血清或其它生物样品中催乳素含量的工具,广泛应用于生物学和动物科学等领域。在使用时,需要严格按照说明书上的操作流程进行,以确保检测结果的准确性和可靠性。
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