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猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒主要是用来做什么的?

发布时间: 2022-05-17  点击次数: 224次
  猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒用于定量分析人血清、血浆、细胞培养上清液和体外细胞裂解液中IL-1的α含量。预包被的抗体是IL-1α单克隆抗体。检测相抗体也是IL-1α单克隆抗体,将样品标记的抗体依次加入酶标板孔中进行反应,然后用PBS或TBS洗涤。然后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;用PBS或TBS彻底清洗后,用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色,在酸的作用下变成最终的黄色。样本中的颜色深度与人类IL-1α正相关。
 

猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒

 

  猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒原名淋巴细胞激活因子(LAF),它激活T细胞和淋巴细胞产生和分泌IL-2,主要由单核细胞和巨噬细胞产生,在炎症和免疫反应中起关键作用。Interleukin-1α和interleukin-1β结合相同的细胞表面受体并引起相同的生物反应。本试剂盒以人白介素-1α为标准,159个氨基酸,分子量为18kDa。
  猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒操作步骤:
  1、室温平衡20分钟后,从铝箔袋中取出所需的条带,剩余的条带用自封袋密封,放回4℃。
  2、设置标准孔、样品孔和空白孔,空白孔不加任何东西;在标准孔μL中加入不同浓度的标准50。
  3、在待测样品孔中加入10个样品μ50。加入样品稀释液40μL。
  4、然后将辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100加入标准孔和样品孔(空白孔不加)μ50。用封板膜密封反应孔,在37℃水浴或培养箱中孵育60min。
  5、倒掉液体,在吸水纸上拍干,每个孔注满洗液,静置1min,扔掉洗液,在吸水纸上拍干,重复洗板5次(可以也可以用洗板机洗板)。
  6、将50个底物A和B加入到所有μ50的孔中。在37℃避光孵育15分钟。
  7、在所有孔μ50中加入终止溶液50。在15min内测量每个孔在450nm波长处的OD值。
    
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